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Di # 9005 gamma-quin

Gamma-Quin®
Chloroquine Diphosphate Solution
Gamma-Quin®
For Removal of Red Cell-Bound Immunoglobulin Chloroquine Diphosphate Solution
For Removal of Red Cell-Bound Immunoglobulin débiles con los hematíes tratados con cloroquina de lo que se esperaba, sin For Removal of Red Cell-Bound Immunoglobulin disociación de hematíes unidos a embargo, y por esta razón se recomienda que la determinación de los de los antígenos no se l eve a cabo con reactivos de salina reactiva siguiendo el INTENDED USE: Gamma-Quin está diseñado para la disociación de hematíes
tratamiento. La aglutinación espontánea de hematíes recubiertos de inmunoglobulina es relativamente extraña en las pruebas realizadas con reactivos de baja proteína, en cualquier evento. En la mayoría de los casos, es innecesario SUMARIO DEL TEST: Las dificultades a la hora de realizar estudios de antígenos
tratar los hematíes positivos de antiglobulina con cloroquina para l evar a cabo la en los hematíes que tienen un test directo de antiglobulina, pueden ser un determinación de los antígenos para los cuales los reactivos de salina reactiva de obstáculo para la investigación minuciosa de algunos problemas serológicos. la especificidad requerida están disponibles. Se pueden realizar pruebas con Cuando la proteína que recubre los hematíes es IgG, es imposible determinar con reactivos de salina reactiva o monoclonales en hematíes cubiertos de reactivos mediante el test indirecto de antiglobulina, y sólo se pueden l evar a cabo inmunoglobulina sin tratamiento de cloroquina, sujetos al funcionamiento de un test pruebas para otros antígenos, si están disponibles reactivos apropiados de grupo de control apropiado para detectar la aglutinación espontánea (como recomienda el sanguíneo reactivos a la salina (hechos de IgM o modificados químicamente de fabricante del reactivo en este insert). Los hematíes tratados con cloroquina también se pueden usar para la En 1964, Domokos y Aszódi estudiaron el efecto de la cloroquina en las reacciones autoadsorción de anticuerpos templados del suero del paciente antes de los test de antígeno-anticuerpo de los hematíes [3], y su influencia in-vivo en la reacción para la presencia de aloanticuerpos. Incluso cuando el tratamiento afecta solo a la antígeno-anticuerpo Rh(D) [4]. La cloroquina es un derivado de la quinolina extracción parcial de la inmunoglobulina fija, la fuerza del test directo de comúnmente utilizado como un agente anti-malaria, el cual también se ha utilizado antiglobulina se puede reducir lo suficiente, para así permitir la interpretación de los empíricamente en el tratamiento de varias enfermedades inmunes. En 1976, resultados de las pruebas, obtenidos en los procedimientos de grupo sanguíneo, o Mantel y Holtz estudiaron el uso de difosfato cloroquino a modo de agente in-vitro para mejorar la eficacia de la auto-absorción templada. El tratamiento no extrae para extraer los auto-anticuerpos de los hematíes de pacientes con anemia completamente los componentes de los hematíes, pero esto no interfiere en las autoinmune, y fueron capaces de obtener eluídos reactivos utilizando este pruebas indirectas de antiglobulina realizadas con reactivos anti-IgG. procedimiento [5]. En la mayoría de casos de anemia hemolítica autoinmune, los anticuerpos se pudieron dividir completamente de los hematíes por incubación con DESCRIPCIÓN DEL REACTIVO: El Gamma-Quin es una solución de
una solución de difosfato cloroquina, ofreciendo un resultado negativo del test de aproximadamente un 16% de difosfato de cloroquina en salina tamponada fosfata antiglobulina después del tratamiento. En pacientes con anemia hemolítica en un pH de 5.0±0.1. No se le ha añadido conservantes; autoinmune sintomática, se obtuvo eluídos fuertemente reactivos después de la incubación con cloroquina, pero el test directo de antiglobulina siguió positivo en la PRECAUCIONES:
mayoría de los casos, como así fue en los casos de dos donantes de sangre Para diagnóstico in-vitro. Almacenar entre 1 y 10 ºC cuando no se utilice. No diluir. aparentemente sanos con hematíes de autoanticuerpo recubiertos, y en dos No congelar. No usar si presenta turbidez o decoloración. Debe minimizar la pacientes con enfermedades no relacionadas con la hemólisis. Edwards, Moulds y contaminación durante su uso. No usar más al á de la fecha de caducidad Judd aplicaron el procedimiento de la cloroquina como un medio para extraer suficiente anticuerpo de los hematíes recubiertos de inmunoglobulina, para permitir a los hematíes tratados que se examinaran con reactivos de grupo sanguíneo No usar si presenta turbidez o decoloración mediante el test indirecto de la antiglobulina [6]. Aunque la cloroquina no es capaz de extraer el autoanticuerpo completamente de los hematíes de test positivo de El formato de la fecha de caducidad se expresa de la siguiente manera CCYY-MM- antiglobulina en todos los casos, incluso la extracción parcial puede l egar a ser suficiente para permitir estudiar los hematíes para el estatus de su grupo sanguíneo, o para usarse con éxito para la autoabsorción de anticuerpos COLECTA DE MUESTRAS Y PREPARACIÓN: No se requiere ninguna
preparación especial del paciente antes de la extracción de la muestra. La sangre debe ser extraída mediante una técnica aséptica, preferiblemente en un PRINCIPIO DEL TEST: Los hematíes que obtienen un test directo de antiglobulina
anticoagulante. La muestra debe ser analizada inmediatamente después de su positivo se incuban en una solución isosmótica de difosfato de cloroquina durante colección. En caso de demora de la prueba, la muestra debe ser almacenada a una un tiempo límite de dos horas en temperatura ambiente, luego se lavan y se temperatura de 1° a 10ºC. La contaminación bacteriológica de la muestra puede resuspenden en salina fisiológica. La reactividad de los antígenos de los hematíes después del tratamiento de cloroquina no está relativamente afectada, como se ha La sangre extraída con EDTA no debe ser almacenada durante más de siete días. comprobado mediante las reacciones obtenidas con reactivos que cumplen los Es preferible examinar las muestras de sangre heparinizadas o oxalizadas después requisitos de potencia de la FDA y son reactivos en un sistema de test de altas dos días de su extracción. Las muestras coaguladas son válidas, pero podemos proteínas o, mediante el test indirecto de antiglobulina. De la misma manera, en tener dificultades para obtener el volumen necesario de hematíes para el casos donde el test directo de antiglobulina se vuelve negativo después del procedimiento. Los hematíes de los coágulos, o de las muestras extraídas en el tratamiento, los hematíes se pueden determinar con reactivos de alta proteína, o ACD o el CPD, se pueden tratar hasta 21 días después de su extracción. con aquel os reactivos mediante el test indirecto de la antiglobulina. Los reactivos de grupo sanguíneo de aglutinación salina (tanto hechos de IgM o IgG modificadas PROCEDIMIENTO:
químicamente) o monoclonales, pueden ofrecer reacciones perceptiblemente más Reactivos Suministrados: Gamma-Quin.
Underline = Addition or significant change ▲= Deletion of text Materiales adicionales requeridos: Tubos de ensayo (aconsejables de 75×12
auténticos con reactivos de salina reactiva (ya sea fabricada de IgM o a partir del mm), pipetas, salina fisiológica, , centrífuga y cronómetro. Antiglobulina Humana y IgG modificado químicamente), indicó, efectivamente, que el tratamiento con Reactivos de Grupo Sanguíneo apropiados para cualquier prueba subsiguiente. cloroquina puede ir acompañado por algún daño en las estructuras de los antígenos de superficie, ya sea o no hasta cierto punto detectable en el decurso de MÉTODO:
las pruebas normales. Estudios más modernos [6,7] sugieren que el tratamiento de 1. Preparar los hematíes que se vayan a tratar lavándolos al menos tres veces cloroquina puede causar resultados de test falso-negativos incluso cuando se usa en volúmenes suficientes de salina fisiológica para quitar el suero o plasma el test indirecto de antiglobulina para la determinación del antígeno. La delicadeza humano contaminante. Suministrar un mínimo de 0.5mL hematíes l enos. Si que tuvieron McShane y Cornwall [7] al utilizar anticuerpos de baja avidez o de bajo se necesitan los hematíes tratados para la autoabsorción templada se título de un único donante, para determinar los hematíes tratados con cloroquina, y necesitará un mayor volumen, y el volumen de Gamma-Quin añadido en el endosar la noción de los reactivos de grupo sanguíneo, se puede considerar fiable paso 3 debe ajustarse de la misma manera. El ratio de reactivo a los para este fin. Se puede concebir, sin embargo, que incluso los anticuerpos de hematíes llenos y lavados debe ser de 4:1. grado reactivo puedan ofrecer reacciones engañosas cuando se usan para 2. Colocar 10 gotas (de aproximadamente 0.5mL) de los hematíes lavados y examinar los hematíes tratados con cloroquina si el antígeno en cuestión resulta l enos en un tubo de ensayo de 75×12mm apropiadamente etiquetado. tener una expresión débil. A la luz de las observaciones, anteriormente 3. Añadir 40 gotas (aproximadamente 2.0mL) de Gamma-Quin y mezclar mencionadas, se deben tomar precauciones a la hora de interpretar los resultados de los procedimientos de determinación de los antígenos en los hematíes tratados 4. Incubar durante un tiempo máximo de dos horas a temperatura ambiente (23°C±3°C). El tiempo de disociación varía entre los pacientes. Treinta Si el test directo de antiglobulina con Anti-IgG,-C3d; Antoglobulina poliespecífica minutos debe considerarse como el tiempo mínimo en el cual la disociación sigue positivo después del tratamiento con cloroquina, se debe considerar la significante de la inmunoglobulina se espera que ocurra. Si se desea, se posibilidad que, sólo los componentes de complemento se quedan fijos a los puede l evar a cabo un test directo de antiglobulina en intervalos de treinta hematíes. Se debe l evar a cabo el test directo de antiglobulina con Antiglobulina minutos en los hematíes que se están tratando, para así controlar el progreso Humana anti-IgG. Si éste ofrece un resultado negativo, la determinación del de la disociación. No extender el tratamiento más de dos horas. antígeno sólo se puede realizar con seguridad con Antiglobulina Humana anti-IgG. 5. Lavar los hematíes por lo menos tres veces en volúmenes suficientes de Si el procedimiento del tratamiento no reduce de una manera significativa la salina fisiológica para quitar la solución de cloroquina. Se puede observar una fuerza de la reacción directa de antiglobulina con ANtiglubulina Humana anti-IgG, ligera hemólisis en algunas muestras, aunque no se debe prestar demasiada este tratamiento no se puede usar para disociar el anticuerpo en este caso. 6. Llevar a cabo un test directo de antiglobulina para ver si el anticuerpo se ha LIMITACIONES: Como en todos los test serológicos, factores tales como los
disociado lo suficiente para permitir una determinación fiable de antígenos de materiales contaminados, tiempo o temperatura de incubación impropia, centrifugación indebida, y examen de aglutinación impropio o la desviación del 7. Resuspender los hematíes en una concentración del 3 al 4% en salina procedimiento de test recomendado, pueden dar lugar a resultados falsos de los fisiológica para pruebas posteriores. Si los hematíes se van a usar para la autoabsorción templada, se deben dejar empaquetados. Los hematíes se 1. El procedimiento del tratamiento durante dos horas puede que no reduzca con pueden tratar con un enzima antes de usarse para la autoabsorción, si así se éxito el resultado del test de la antiglobulina directo a negativo. La prolongación del tratamiento, o su repetición en hematíes ya tratados una vez, puede provocar el deterioro de la reactividad del antígeno. CONTROL DE CALIDAD: El único control necesario es el test directo de
2. Los componentes de complemento no se disocian de los hematíes mediante antiglobulina en los hematíes después del tratamiento como se indica en el paso 6 del procedimiento del tratamiento. Éste no se volverá negativo en ningún caso, 3. Puede aparecer hemólisis durante el tratamiento con algunas muestras de pero su fuerza se puede reducir lo suficiente mediante el tratamiento, para permitir sangre, pero debemos ignorar este fenómeno siempre y cuando no sea que se l even a cabo y se interpreten correctamente los test de grupo sanguíneo, o excesivo. La hemólisis puede ir asociada con la maduración de los hematíes para permitir que los hematíes tratados que se usarán de una forma efectiva para que se están tratando, la naturaleza del anticoagulante al cual fue extraído o, la autoabsorción templada se l even a cabo. en pocas ocasiones, con la fragilidad incrementada de los hematíes que se El procedimiento de disociación de la cloroquina puede que no funcione en todos los casos, pero el fracaso constante del tratamiento en reducir la fuerza del test 4. Las determinaciones de antígeno en hematíes tratados en cloroquina se deben directo de antiglobulina in vivo en hematíes recubiertos procedentes de diferentes interpretar cuidadosamente, ya que las reacciones pueden, de alguna manera, pacientes puede ser un indicador del deterioro del producto. La eficacia del ser más débiles que en los hematíes no tratados, incluso cuando se usan producto se puede probar incubando los hematíes D+ con anti-D y, luego intentar reactivos de antiglobulina reactiva o de alta proteína que cumplen los requisitos desasociar el anticuerpo que lo recubre, aplicando el procedimiento del tratamiento. de potencia de la FDA. Los reactivos de grupo sanguíneo monoclonales o de El anticuerpo que recubre los hematíes in vitro es normalmente más resistente a la salina reactiva no se deben usar para la determinación del antígeno en los disociación que lo es en el caso con la mayoría de auto-anticuerpos, pero una hematíes tratados con cloroquina, ya que las reacciones pueden ser reducción significativa en la fuerza de la reacción de la antiglobulina después del marcadamente más débiles de lo que se esperaba, dando pie a la posibilidad tratamiento, indicaría que el producto es aún efectivo. 5. Se ha sugerido una propuesta alternativa para el uso de difosfato de cloroquina INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS POR EL
en serología de grupo sanguíneo, o sea la extracción de los l amados TRATAMIENTO: Un test directo negativo de antiglobulina en los hematíes tratados
antígenos Bg de los hematíes a modo de ayuda para la identificación de los indica que la inmunoglobulina se ha disociado completamente de los hematíes, y anticuerpos [8]. Este método está basado en la observación de que los que los hematíes tratados se pueden clasificar mediante el procedimiento del test antígenos HLA se pueden extraer de las plaquetas y de los neutrófilos indirecto de antiglobulina, o con reactivos que contienen potenciadores capaces de mediante el tratamiento de cloroquina, y puede tener éxito en la reducción de causar aglutinación espontánea de los hematíes cubiertos de inmunoglobulina. la reactividad de los antígenos Bg en los hematíes. Los resultados obtenidos Incluso una reducción sustancial en la fuerza del test directo de antiglobulina en esta aplicación deben interpretarse con especial cuidado, ya que hay clara después del tratamiento puede aportar más estudios sobre los hematíes del evidencia que la reactividad de los antígenos de superficie de los hematíes paciente, o hará el procedimiento de auto-absorción templado más efectivo. pueden resultar perjudicados mediante el tratamiento de cloroquina, el cual La reactividad de algunos grupos sanguíneos puede de alguna manera ser puede conducir a una reacción negativa con un anticuerpo débilmente reactivo perjudicada por tratamientos de cloroquina. Edwards, Moulds y Judd, en su estudio original, no notaron ninguna pérdida de reactividad mediante el test indirecto de antiglobulina con los anticuerpos de grado reactivos [4]. Un estudio posterior de CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DE FUNCIONAMIENTO: La solución
Sassetti y Nichol s, indicó que los resultados falso-negativos pueden ocurrir cuando Gamma-Quin Chloroquine Diphosphate está probada y se ha comprobado que nos examinamos los hematíes tratados con cloroquina con reactivos Rh fabricados a ofrecen unos resultados satisfactorios si se utiliza mediante el procedimiento de partir del IgG modificado químicamente [5]. La observación que efectuaron Sassetti tratamiento para disociar el IgG fijo in vivo e in vitro a los hematíes humanos. Se y Nichol s, de que mientras que no sería ordinariamente necesario tratar los consigue este efecto reduciendo marcadamente la reactividad de los antígenos hematíes cubiertos de inmunoglobulina, como preámbulo para obtener resultados heredados comunes en los hematíes, como se ha comprobado con los reactivos de Underline = Addition or significant change ▲= Deletion of text grupo sanguíneo, mediante el test indirecto de antiglobulina o en un sistema de prueba de alta proteína. El producto no se ha probado para comprobar su habilidad de quitar los antígenos l amados Bg de los hematíes. Estos están sujetos a una amplia variación en la fuerza de su expresión, y no sería posible generalizar sobre la eficacia del procedimiento en las bases de pruebas meramente con unos ejemplos disponibles de hematíes "Bg+". No existen normas establecidas de potencia norteamericanas para este producto. El buen funcionamiento de este producto depende del seguimiento de los métodos recomendados que se encuentran en este insert. Para información adicional o soporte técnico consulte con el Servicio Técnico de Immucor al 800-492-BLUD (2583) o al 770-441-2051.
BIBLIOGRAFÍA:
1. Domokos V, Aszódi L. The effect of chloroquine on the isoantibody reaction of red blood cells. Haemat Hung 1964; 4:179-186. 2. Domokos V, Aszódi L. The in-vivo influencing of Rh(D) antigen-antibody reaction by chloroquine. Haemat Hung 1964; 4:355-360. 3. Mantel W, Holtz G. Characterisation of autoantibodies to erythrocytes in autoimmune haemolytic anaemia by chloroquine. Vox Sang 1976; 30:453-463. 4. Edwards JM, Moulds JJ, Judd WJ. Chloroquine dissociation of antigen-antibody complexes: A new technic for typing red blood cells with a positive direct antiglobulin test. Transfusion 1982; 22:59-61. 5. Sassetti R, Nichol s D. Decreased antigen reactivity caused by chloroquine. (Letter to the editor.) Transfusion 1982; 22:537-538. 6. Mallory D, Reid M. Misleading effects of chloroquine. (Letter to the editor.) 7. McShane K, Cornwall S. Chloroquine reduces antigen strength. (Letter to the 8. Swanson JL, Sastamoinen R. Chloroquine stripping of HLA A,B antigens from red cells. (Letter to the editor.) Transfusion 1985; 25:439-440. Código del Insert: es9005J
Revisión: Diciembre 2005
Underline = Addition or significant change ▲= Deletion of text

Source: http://www.felsan.com.ar/productos/imagenes/incertoscertificadosimmun/pdf_insert%20paneles/Gamma%20Quin%20Cloroquina.pdf

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